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    Tamoxifen誘導Cre-ERT2小鼠 使用指南

    發(fā)布時(shí)間: 2024-06-20  點(diǎn)擊次數: 248次

    Cre-ERT2小鼠是一類(lèi)含有雌激素受體的配體結合區突變體(ERT)與cre重組酶的融合蛋白表達的小鼠。Cre-ERT2在無(wú)Tamoxifen誘導的情況下,在細胞質(zhì)內處于無(wú)活性狀態(tài);當Tamoxifen誘導后,Tamoxifen的代謝產(chǎn)物4-OHT(雌激素類(lèi)似物)與ERT結合,可使Cre-ERT2進(jìn)核發(fā)揮Cre重組酶活性。


    Tamoxifen給藥建議如下:

    Tamoxifen誘導Cre-ERT2小鼠 使用指南

    3. 他莫昔芬的給藥方式

    他莫昔芬可以通過(guò)腹腔注射、灌胃、飲食或飲水等途徑給藥,應用比較廣的是腹腔注射給藥,腹腔注射的給藥劑量精準,便于控制。

    腹腔注射給藥流程:正確抓取小鼠,將小鼠的鼻子朝向地面,露出腹部;定位動(dòng)物的中線(xiàn)并將腹部分成四個(gè)象限,特別是動(dòng)物的右下象限,是腹腔注射的合適位置(右下象限缺少重要的解剖結構);多次腹腔注射時(shí),應交替注射部位。

    Tamoxifen誘導Cre-ERT2小鼠 使用指南

    注:Tamoxifen會(huì )影響胎兒發(fā)育和生產(chǎn),孕鼠誘導的時(shí)間盡量選擇孕晚期,并同時(shí)注射孕酮來(lái)減少流產(chǎn)概率。

    灌胃給藥的給藥劑量和頻率與腹腔注射相同,在正式實(shí)驗前,建議同學(xué)們先反復練習,熟練掌握灌胃給藥的技巧。

    飲食/飲水給藥使用較少,主要是他莫昔芬水溶性差,小鼠的給藥劑量不好量化,且需要的誘導時(shí)間較長(cháng)(一般需要幾周進(jìn)行誘導),在誘導期間往往還伴隨著(zhù)小鼠體重的下降(約10-15%)。


    4. 注意事項

    A. 他莫昔芬注射完成后不建議立刻開(kāi)展實(shí)驗,一般來(lái)講,停藥后需要繼續飼養7天,再安排后續實(shí)驗。

    B. 對照組小鼠需要同步進(jìn)行不含他莫昔芬的玉米油溶液給藥。

    C. 未處理的小鼠需要和注射他莫昔芬的小鼠分籠飼養,小鼠舐舔到他莫昔芬懸液,梳毛等行為可能導致意外敲除。

    D. 加熱不會(huì )導致Tamoxifen失效,37℃過(guò)夜溶解他莫昔芬是沒(méi)有問(wèn)題的。

    最后,不同的實(shí)驗方案、不同的小鼠品系、不同的組織器官等對于給藥劑量、給藥頻率和給藥方式等的要求往往是不同的,因此,上述方法只是一個(gè)參考,面對具體實(shí)驗時(shí),同學(xué)們還應根據參考文獻、實(shí)驗經(jīng)驗先進(jìn)行預實(shí)驗,以確定最佳方案。

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