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    WB實(shí)驗詳細步驟及用到的相關(guān)試劑匯總

    發(fā)布時(shí)間: 2024-06-17  點(diǎn)擊次數: 310次

    以下是 WB 實(shí)驗的詳細步驟及相關(guān)試劑耗材匯總:


    一、實(shí)驗步驟

    1. 蛋白提?。菏褂眠m當的裂解液提取蛋白。
    2. 蛋白定量:采用 Bradford 法或 BCA 法等測定蛋白濃度。
    3. SDS-PAGE 電泳:配制分離膠和濃縮膠,上樣進(jìn)行電泳。
    4. 轉膜:將蛋白從凝膠轉移到 PVDF 或 NC 膜上。
    5. 封閉:用封閉液封閉膜。
    6. 一抗孵育:加入一抗,室溫或 4℃孵育。
    7. 洗滌:用洗滌液多次洗滌膜。
    8. 二抗孵育:加入相應的二抗,孵育后洗滌。
    9. 顯色:使用化學(xué)發(fā)光試劑顯色,曝光并成像。

    二、試劑耗材

    1. 試劑:裂解液、PBS、蛋白上樣緩沖液、電泳緩沖液、轉膜緩沖液、封閉液、一抗、二抗、化學(xué)發(fā)光試劑等。
    2. 耗材:移液器及槍頭、離心管、培養皿、電泳槽、轉膜裝置、PVDF 膜或 NC 膜等。

    需要注意的是,具體的實(shí)驗步驟和試劑耗材可能因實(shí)驗條件和要求的不同而有所差異。在實(shí)驗過(guò)程中,要嚴格按照操作規范進(jìn)行,以確保實(shí)驗結果的準確性和可靠性。


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